cancerspЮжно-Российский онкологический журнал/ South Russian Journal of CancerSouth Russian Journal of Cancer2686-9039АНО "Перспективы онкологии"10.37748/2686-9039-2021-2-3-3cancersp-119Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESВлияние онколитических штаммов новой неклассифицированной группы ротавирусов человека на лимфоциты периферической кровиInfluence of oncolytic strains of a new unclassified group of human rotaviruses on peripheral blood lymphocyteshttps://orcid.org/0000-0003-3061-6108КитО. И.KitO. I.

Кит Олег Иванович – член-корр. РАН, д.м.н., профессор, генеральный директор

SPIN: 1728-0329

AuthorID: 343182

ResearcherID: U-2241-2017

Scopus Author ID: 55994103100 

344037, г. Ростов-на-Дону, ул. 14-я линия, д. 63

Oleg I. Kit – member of Russian Academy of Sciences, Dr. Sci. (Med.), professor, general director

SPIN: 1728-0329

AuthorID: 343182

ResearcherID: U-2241-2017

Scopus Author ID: 55994103100 

63 14 line str., Rostov-on-Don 344037

onko-sekretar@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-4558-5896ФилипповаС. Ю.FilippovaS. Yu.

Филиппова Светлана Юрьевна – научный сотрудник лаборатории клеточных технологий

SPIN: 9586-2785

AuthorID: 878784

Scopus Author ID: 57189618843 

344037, г. Ростов-на-Дону, ул. 14-я линия, д. 63

Svetlana Yu. Filippova – researcher at the Laboratory of Cellular Technologies

SPIN: 9586-2785

AuthorID: 878784

Scopus Author ID: 57189618843 

63 14 line str., Rostov-on-Don 344037

filsv@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-5945-5961ТимофееваС. В.TimofeevaS. V.

Тимофеева Софья Владимировна – научный сотрудник лаборатории клеточных технологий

SPIN: 5362-1915

AuthorID: 1064599 

344037, г. Ростов-на-Дону, ул. 14-я линия, д. 63

Sofia V. Timofeeva – researcher at the Laboratory of Cellular Technologies

SPIN: 5362-1915

AuthorID: 1064599 

63 14 line str., Rostov-on-Don 344037

timofeeva.sophia@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-6035-1756СитковскаяА. О.SitkovskayaA. O.

Ситковская Анастасия Олеговна – заведующая лаборатории клеточных технологий

SPIN: 1659-6976

AuthorID: 791081

ResearcherID: E-7496-2018

Scopus Author ID: 56381527400 

344037, г. Ростов-на-Дону, ул. 14-я линия, д. 63

Anastasiya O. Sitkovskaya – Head of the Laboratory of Cellular Technologies

SPIN: 1659-6976

AuthorID: 791081

ResearcherID: E-7496-2018

Scopus Author ID: 56381527400 

63 14 line str., Rostov-on-Don 344037

grankina.anastasia@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1410-122XЗлатникЕ. Ю.ZlatnikE. Yu.

Златник Елена Юрьевна – д.м.н., профессор, главный научный сотрудник

SPIN: 4137-7410

AuthorID: 327457

Scopus Author ID: 6603160432 

344037, г. Ростов-на-Дону, ул. 14-я линия, д. 63

Elena Yu. Zlatnik – Dr. Sci. (Med.), professor, chief scientific officer

SPIN: 4137-7410

AuthorID: 327457

Scopus Author ID: 6603160432 

63 14 line str., Rostov-on-Don 344037

elena-zlatnik@mail.ruКолпаковС. А.KolpakovS. A.

Колпаков Сергей Анатольевич – к.м.н., старший научный сотрудник лаборатории вирусологии, микробиологии и молекулярно-биологических методов исследования

SPIN: 5569-4171

AuthorID: 348236 

344000, г. Ростов-на-Дону, пер. Газетный, д. 119

Sergey A. Kolpakov – Cand. Sci. (Med.), senior researcher at the Laboratory of Virology, Microbiology and Molecular Biology Research Methods

SPIN: 5569-4171

AuthorID: 348236 

119 Gazetny Lane, Rostov-on-Don, 344000

rostovniimp@rniimp.ruКолпаковаЕ. П.KolpakovaE. P.

Колпакова Елена Павловна – научный сотрудник лаборатории вирусологии, микробиологии и молекулярно-биологических методов исследования 

SPIN: 3942-7583

AuthorID: 981877 

344000, г. Ростов-на-Дону, пер. Газетный, д. 119

Elena P. Kolpakova – employee at the Laboratory of Virology, Microbiology and Molecular Biology Research Methods

SPIN: 3942-7583

AuthorID: 981877 

119 Gazetny Lane, Rostov-on-Don, 344000

rostovniimp@rniimp.ruБондаренкоЕ. С.BondarenkoE. S.

Бондаренко Елена Сергеевна – младший научный сотрудник лаборатории клеточных технологий

SPIN: 3117-4040

AuthorID: 865798 

344037, г. Ростов-на-Дону, ул. 14-я линия, д. 63

Elena S. Bondarenko – junior researcher at the Laboratory of Cellular Technologies

SPIN: 3117-4040

AuthorID: 865798 

63 14 line str., Rostov-on-Don 344037

lena.lenalen@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-6496-9641НовиковаИ. А.NovikovaI. A.

Новикова Инна Арнольдовна – к.м.н., заместитель генерального директора по науке

SPIN: 4810-2424

AuthorID: 726229 

344037, г. Ростов-на-Дону, ул. 14-я линия, д. 63

Inna A. Novikova – Cand. Sci. (Med.), deputy director general for science

SPIN: 4810-2424

AuthorID: 726229 

63 14 line str., Rostov-on-Don 344037

onko-sekretar@mail.ruФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава РоссииРоссияNational Medical Research Centre for Oncology of the Ministry of Health of RussiaRussian FederationФБУН «Ростовский НИИ микробиологии и паразитологии» РоспотребнадзораРоссияRostov Research Institute of Microbiology and Parasitology of RospotrebnadzorRussian Federation202106092021232330Copyright © Кит О.И., Филиппова С.Ю., Тимофеева С.В., Ситковская А.О., Златник Е.Ю., Колпаков С.А., Колпакова Е.П., Бондаренко Е.С., Новикова И.А., 20212021Кит О.И., Филиппова С.Ю., Тимофеева С.В., Ситковская А.О., Златник Е.Ю., Колпаков С.А., Колпакова Е.П., Бондаренко Е.С., Новикова И.А.Kit O.I., Filippova S.Y., Timofeeva S.V., Sitkovskaya A.O., Zlatnik E.Y., Kolpakov S.A., Kolpakova E.P., Bondarenko E.S., Novikova I.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.cancersp.com/jour/article/view/119

Цель исследования. Оценка цитотоксического действия штаммов RVK100 и RVK228 новой неклассифицированной группы ротавирусов человека на мононуклеарные клетки периферической крови человека in vitro.Материалы и методы. В качестве материала для исследования использовали мононуклеарные клетки периферической крови здорового донора. На клетки воздействовали двумя штаммами RVK100 и RVK228 в течение 24 и 48 часов. Цитотоксичность тестируемых вирусов оценивали с помощью теста Colorimetric Cell Viability Kit I (WST-8) (PromoCell, Германия). Анализ субпопуляционного состава лимфоцитов оценивали на проточном цитофлуориметре FACSCantoII (BD, США) с использованием панели моноклональных антител к человеческим антигенам: CD3, CD4, CD8, CD16/56, CD19, CD45, CD38, HLA-DR.Результаты. По данным теста на жизнеспособность не было обнаружено достоверно значимого снижения количества живых клеток в образцах с добавлением вирусов по сравнению с контролем. Напротив, после 48 часов культивирования в образцах с добавлением RVK228 количества живых клеток было достоверно больше, чем в контроле. Исследование субпопуляционного состава лимфоцитов показало относительное увеличение количества маркеров ранней активации на Т-клетках в образцах с вирусами, которое также было более выражено в образцах с добавлением RVK228.Заключение. Исследуемые штаммы ротавирусов не оказывают цитотоксического действия на мононуклеарные клетки периферической крови человека. При этом штамм RVK228, вероятно, обладает способностью к активации лимфоцитов.

Purpose of the study. Evaluation of the cytotoxic effect of strains RVK100 and RVK228 of a new unclassified group of human rotaviruses on human peripheral blood mononuclear cells in vitro.Materials and methods. As a material for the study, we used peripheral blood mononuclear cells of a healthy donor. The cells were exposed to two strains of rotaviruses RVK100 and RVK228 for 24 and 48 hours. The cytotoxicity of the tested viruses was assessed using the Colorimetric Cell Viability Kit I (WST-8) (PromoCell, Germany). Analysis of lymphocytes subpopulation composition was assessed on a FACSCantoII flow cytometer (BD, USA) using monoclonal antibodies to human antigens: CD3, CD4, CD8, CD16/56, CD19, CD45, CD38, HLA-DR.Results. According to the cell viability test, there was no significant decrease in the number of living cells in the samples with the addition of viruses in comparison with the control. On the contrary, after 48 hours of cultivation in the samples with the addition of RVK228, the number of living cells was significantly higher than in the control. The study of lymphocytes subpopulation composition showed a relative increase in the number of early activation markers on T cells in samples with viruses, which was also more pronounced in samples with the addition of RVK228.Conclusion. The investigated strains of rotaviruses have no cytotoxic effect on human peripheral blood mononuclear cells. Moreover, the RVK228 strain is likely to have the ability to activate lymphocytes.

онколитические вирусыротавирусымононуклеарные клетки периферической кровицитотоксический тестпроточная цитофлуориметрияoncolytic virusesrotavirusesperipheral blood mononuclear cellscytotoxicity assayflow cytometryReferencesNaghavi M., Abajobir A.A., Abbafati C., Abbas K.M., Abd-Allah F., Abera S.F, Aboyans V., et al. Global, regional, and national age-sex specific mortality for 264 causes of death, 1980-2016: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2016. Lancet. 2017;390(10100):1151-1210. DOI:10.1016/S0140-6736(17)32152-9.Naghavi M., Abajobir A.A., Abbafati C., Abbas K.M., Abd-Allah F., Abera S.F, Aboyans V., et al. Global, regional, and national age-sex specific mortality for 264 causes of death, 1980-2016: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2016. Lancet. 2017;390(10100):1151-1210. DOI:10.1016/S0140-6736(17)32152-9.Liang M. Oncorine, the world first oncolytic virus medicine and its update in China. Curr. Cancer Drug Targets. 2018;18(2):171-176. DOI:10.2174/1568009618666171129221503.Liang M. Oncorine, the world first oncolytic virus medicine and its update in China. Curr. Cancer Drug Targets. 2018;18(2):171-176. DOI:10.2174/1568009618666171129221503.Conry R.M., Westbrook B., McKee S., Norwood T.G. Talimogene laherparepvec: first in class oncolytic virotherapy. Hum. Vaccin. Immunother. 2018;14(4):839–846. DOI:10.1080/21645515.2017.1412896.Conry R.M., Westbrook B., McKee S., Norwood T.G. Talimogene laherparepvec: first in class oncolytic virotherapy. Hum. Vaccin. Immunother. 2018;14(4):839–846. DOI:10.1080/21645515.2017.1412896.Mesev E.V., LeDesma R.A., Ploss A. Decoding type I and III interferon signalling during viral infection. Nat Microbiol. 2019;4(6):914-924. DOI:10.1038/s41564-019-0421-x.Mesev E.V., LeDesma R.A., Ploss A. Decoding type I and III interferon signalling during viral infection. Nat Microbiol. 2019;4(6):914-924. DOI:10.1038/s41564-019-0421-x.Dyer A., Schoeps B., Frost S., Jakeman P., Scott E.M., Freedman J., Jacobus E.J., Seymour L.W. Antagonism of glycolysis and reductive carboxylation of glutamine potentiates activity of oncolytic adenoviruses in cancer cells. Cancer Res. 2019;79(2):331-345. DOI:10.1158/0008-5472.CAN-18-1326.Dyer A., Schoeps B., Frost S., Jakeman P., Scott E.M., Freedman J., Jacobus E.J., Seymour L.W. Antagonism of glycolysis and reductive carboxylation of glutamine potentiates activity of oncolytic adenoviruses in cancer cells. Cancer Res. 2019;79(2):331-345. DOI:10.1158/0008-5472.CAN-18-1326.Russell S.J., Peng K.W., Bell J.C. Oncolytic virotherapy. Nat Biotechnol. 2012;30(7):658-70. DOI:10.1038/nbt.2287.Russell S.J., Peng K.W., Bell J.C. Oncolytic virotherapy. Nat Biotechnol. 2012;30(7):658-70. DOI:10.1038/nbt.2287.Колпаков С.А., Колпакова Е.П. Новая группа ротавирусов человека семейства Reoviridae. Живые и биокосные системы. 2014;10:6.Kolpakov S.A., Kolpakova E.P. A new group of human rotaviruses of the Reoviridae family. Living and bioinert systems. 2014; 10: 6. (In Russian).Колпаков С.А., Колпакова Е.П., Златник Е.Ю. Штамм новой группы ротавирусов семейства Reoviridae препятствует перевиваемости и росту опухоли яичника крыс в эксперименте. Злокачественные опухоли. 2019;9(3):С. 135.Kolpakov S.A., Kolpakova E.P., Zlatnik E.Yu. 2019. The strain of a new group of rotaviruses of the Reoviridae family interferes with transplantation and tumor growth of rat ovary in the experiment. Malignant tumors. V. 9. № 3. P. 135. (In Russian).Златник Е.Ю., Колпаков С.А., Колпакова Е.П., Ситковская А.О., Шульгина О.Г., Непомнящая Е.М. Исследование онколитического действия новой неклассифицированной группы ротавирусов человека семейства Reoviridae на эпидермоидную карциному in vivo. Белые ночи 2020: тезисы VI Петербургского международного онкологического форума, Санкт-Петербург, 25–28 июня 2020 года. – Санкт-Петербург: Вопросы онкологии, 2020:138.Zlatnik E.Yu., Kolpakov S.A., Kolpakova E.P., Sitkovskaya A.O., Shulgina O.G., Nepomnyashchaya E.M. Investigation of the oncolytic effect of a new unclassified group of human rotaviruses of the family Reoviridae on epidermoid carcinoma in vivo. White Nights 2020: Abstracts of the VI St. Petersburg International Oncological Forum, St. Petersburg, June 25-28, 2020. - St. Petersburg: Problems of Oncology, 2020: 138. (In Russian).Ситковская А.О., Филиппова С.Ю., Златник Е.Ю., Колпаков С.А., Колпакова Е.П., Межевова И.В., Бондаренко Е.С., и др. Цитотоксическое действие неклассифицированных ротавирусов группы К на культуры клеток T98G и U87MG in vitro. Цитология. 2020;62(3):189-200. DOI 10.31857/S0041377120030062.Sitkovskaya A.O., Filippova S.Yu., Zlatnik E.Yu., Kolpakov S.A., Kolpakova E.P., Mezhevova I.V., Bondarenko E.S., et al. Cytotoxic effect of unclassified rotaviruses of the group K on cultures of T98G and U87MG cells in vitro. Cytology. 2020; 62 (3): 189-200. (In Russian). DOI 10.31857/S0041377120030062.Ситковская А.О., Златник Е.Ю., Филиппова С.Ю., Бондаренко Е.С., Ващенко Л.Н., Кечеджиева Э.Э., Дашкова И.Р., и др. Влияние интерлейкинов 2, 7, 15 на пролиферацию натуральных киллеров in vitro. Российский биотерапевтический журнал. 2021;20(1):56-66. DOI:10.17650/1726-9784-2021-20-1-56-66.Sitkovskaya A.O., Zlatnik E.Yu., Filippova S.Yu., Bondarenko E.S., Vaschenko L.N., Kechedzhieva E.E., Dashkova I.R., et al. Influence of interleukins 2, 7 , 15 on the proliferation of natural killer cells in vitro. Russian biotherapeutic journal. 2021;20(1):56-66. (In Russian). DOI:10.17650/1726-9784-2021-20-1-56-66.Yasukawa M, Nakagomi O, Kobayashi Y. Rotavirus induces proliferative response and augments non-specific cytotoxic activity of lymphocytes in humans. Clin Exp Immunol. 1990;80(1):49-55. DOI:10.1111/j.1365-2249.1990.tb06440.x.Yasukawa M, Nakagomi O, Kobayashi Y. Rotavirus induces proliferative response and augments non-specific cytotoxic activity of lymphocytes in humans. Clin Exp Immunol. 1990;80(1):49-55. DOI:10.1111/j.1365-2249.1990.tb06440.x.Mesa M.C., Rodríguez L.S., Franco M.A., Angel J. Interaction of rotavirus with human peripheral blood mononuclear cells: plasmacytoid dendritic cells play a role in stimulating memory rotavirus specific T cells in vitro. Virology. 2007;366(1):174-84. DOI:10.1016/j.virol.2007.04.007.Mesa M.C., Rodríguez L.S., Franco M.A., Angel J. Interaction of rotavirus with human peripheral blood mononuclear cells: plasmacytoid dendritic cells play a role in stimulating memory rotavirus specific T cells in vitro. Virology. 2007;366(1):174-84. DOI:10.1016/j.virol.2007.04.007.Pane J.A., Webster N.L., Coulson B.S. Rotavirus activates lymphocytes from non-obese diabetic mice by triggering toll-like receptor 7 signaling and interferon production in plasmacytoid dendritic cells. PLoS Pathog. 2014;10(3):e1003998. DOI:10.1371/journal.ppat.1003998.Pane J.A., Webster N.L., Coulson B.S. Rotavirus activates lymphocytes from non-obese diabetic mice by triggering toll-like receptor 7 signaling and interferon production in plasmacytoid dendritic cells. PLoS Pathog. 2014;10(3):e1003998. DOI:10.1371/journal.ppat.1003998.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.