Цель исследования

cancersp

Южно-Российский онкологический журнал/ South Russian Journal of Cancer

South Russian Journal of Cancer

2686-9039

АНО "Перспективы онкологии"

10.37748/2686-9039-2022-3-4-2

cancersp-185

Research Article

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

ORIGINAL ARTICLES

Опыт создания коллекции клеточных культур немелкоклеточного рака легкого в ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России

Practical experience of a lung cancer primary cell culture collection creation at the National Medical Research Centre for Oncology

https://orcid.org/0000-0002-7902-7278

Межевова

И. В.

Mezhevova

I. V.

Межевова Ирина Валентиновна - младший научный сотрудник лаборатории клеточных технологий,

г. Ростов-на-Дону

SPIN: 3367-1741,

AuthorID: 1011695,

ResearcherID: AAI-1860-2019,

Scopus Author ID: 57296602900

Irina V. Mezhevova - junior research fellow at the laboratory of cellular technologies,

Rostov-on-Don

SPIN: 3367-1741,

AuthorID: 1011695,

ResearcherID: AAI-1860-2019,

Scopus Author ID: 57296602900

mezhevova88@gmail.com

https://orcid.org/0000-0002-6035-1756

Ситковская

А. О.

Sitkovskaya

A. O.

Ситковская Анастасия Олеговна - к.б.н., заведующая лабораторией клеточных технологий,

г. Ростов-на-Дону

SPIN: 9586-2785,

AuthorID: 878784,

ResearcherID: E-7496-2018,

Scopus Author ID: 56381527400

Anastasiya O. Sitkovskaya - Cand. Sci. (Biol.), the chief of laboratory of cellular technologies,

Rostov-on-Don

SPIN: 9586-2785,

AuthorID: 878784,

ResearcherID: E-7496-2018,

Scopus Author ID: 56381527400

grankina.anastasia@mail.ru

https://orcid.org/0000-0002-4558-5896

Филиппова

С. Ю.

Filippova

S. Yu.

Филиппова Светлана Юрьевна - научный сотрудник лаборатории клеточных технологий,

г. Ростов-на-Дону

SPIN: 1659-6976,

AuthorID: 791081,

ResearcherID: AAH-4408-2020,

Scopus Author ID: 57189618843

Svetlana Yu. Filippova - research fellow at the laboratory of cellular technologies,

Rostov-on-Don

SPIN: 1659-6976,

AuthorID: 791081,

ResearcherID: AAH-4408-2020,

Scopus Author ID: 57189618843

flsv@yandex.ru

https://orcid.org/0000-0002-4555-8556

Шамова

Т. В.

Shamova

T. V.

Шамова Татьяна Владимировна - младший научный сотрудник лаборатории клеточных технологий,

г. Ростов-на-Дону

SPIN: 5426-1873,

AuthorID: 1051985,

ResearcherID: AAR-3198-2021,

Scopus Author ID: 57221303597

Tatyana V. Shamova - junior research fellow at the laboratory of cellular technologies,

Rostov-on-Don

SPIN: 5426-1873,

AuthorID: 1051985,

ResearcherID: AAR-3198-2021,

Scopus Author ID: 57221303597

tanyshamova@mail.ru

https://orcid.org/0000-0002-5945-5961

Тимофеева

С. В.

Timofeeva

S. V.

Тимофеева Софья Владимировна - научный сотрудник лаборатории клеточных технологий,

г. Ростов-на-Дону

SPIN: 5362-1915,

AuthorID: 1064599,

ResearcherID: AAH-4834-2020,

Scopus Author ID: 57243356500

Sofia V. Timofeeva - research fellow at the laboratory of cellular technologies,

Rostov-on-Don

SPIN: 5362-1915,

AuthorID: 1064599,

ResearcherID: AAH-4834-2020,

Scopus Author ID: 57243356500

timofeeva.sophia@gmail.com

https://orcid.org/0000-0002-3691-3317

Гненная

Н. В.

Gnennaya

N. V.

Гненная Надежда Владимировна - младший научный сотрудник лаборатории клеточных технологий,

г. Ростов-на-Дону

SPIN: 9244-2318,

AuthorID: 900758,

ResearcherID: V-5582-2018,

Scopus Author ID: 57214806863

Nadezhda V. Gnennaya - junior research fellow at the laboratory of cellular technologies,

Rostov-on-Don

SPIN: 9244-2318,

AuthorID: 900758,

ResearcherID: V-5582-2018,

Scopus Author ID: 57214806863

ngnennaya@inbox.ru

https://orcid.org/0000-0002-6496-9641

Новикова

И. А.

Novikova

I. A.

Новикова Инна Арнольдовна - к.м.н., заместитель генерального директора по науке,

г. Ростов-на-Дону

SPIN: 4810-2424,

AuthorID: 726229,

ResearcherID: E-7710-2018,

Scopus Author ID: 57202252773

Inna A. Novikova - Cand. Sci. (Med.), deputy chief of sciences,

Rostov-on-Don

SPIN: 4810-2424,

AuthorID: 726229,

ResearcherID: E-7710-2018,

Scopus Author ID: 57202252773

novikovainna@yahoo.com

https://orcid.org/0000-0003-0640-2994

Харагезов

Д. А.

Kharagezov

D. A.

Харагезов Дмитрий Акимович - к.м.н., врач-онколог, заведующий отделением торакальной онкологии,

г. Ростов-на-Дону

SPIN: 5120-0561,

AuthorID: 733789,

ResearcherID: AAZ-3638-2021,

Scopus Author ID: 56626499300

Dmitriy A. Kharagezov - Cand. Sci. (Med.), oncologist, chief of thoracic oncology department,

Rostov-on-Don

SPIN: 5120-0561,

AuthorID: 733789,

ResearcherID: AAZ-3638-2021,

Scopus Author ID: 56626499300

dmitr8@mail.ru

https://orcid.org/0000-0002-2589-7606

Милакин

А. Г.

Milakin

A. G.

Милакин Антон Григорьевич - врач-онколог отделения торакальной онкологии,

г. Ростов-на-Дону

SPIN: 7737-4737,

AuthorID: 794734,

Scopus Author ID: 57192109933

Anton G. Milakin - MD, oncologist at the department of thoracic oncology,

Rostov-on-Don

SPIN: 7737-4737,

AuthorID: 794734,

Scopus Author ID: 57192109933

amilakin@yandex.ru

https://orcid.org/0000-0003-2572-1624

Лейман

И. А.

Leiman

I. A.

Лейман Игорь Александрович - к.м.н., врач-онколог отделения торакальной онкологии,

г. Ростов-на-Дону

SPIN: 2551-0999,

AuthorID:735699,

Scopus Author ID: 57225151943

Igor A. Leiman - Cand. Sci. (Med.), oncologist at the department of thoracic oncology,

Rostov-on-Don

SPIN: 2551-0999,

AuthorID:735699,

Scopus Author ID: 57225151943

toraxrnioi@yandex.ru

https://orcid.org/0000-0003-4513-7548

Статешный

О. Н.

Stateshny

O. N.

Статешный Олег Николаевич - врач-онколог отделения торакальной онкологии,

г. Ростов-на-Дону

SPIN: 9917-1975,

AuthorID: 1067071

Oleg N. Stateshny - MD, oncologist at the department of thoracic oncology,

Rostov-on-Don

SPIN: 9917-1975,

AuthorID: 1067071

stateshny@rambler.ru

https://orcid.org/0000-0003-2937-0470

Росторгуев

Э. Е.

Rostorguev

E. E.

Росторгуев Эдуард Евгеньевич - д.м.н., заведующий отделением нейроонкологии, врач-нейрохирург,

г. Ростов-на-Дону

SPIN: 8487-9157,

AuthorID:794808,

Scopus Author ID: 57196005138

Eduard E. Rostorguev - Dr. Sci. (Med.), chief of the neuronal oncology department,

Rostov-on-Don

SPIN: 8487-9157,

AuthorID:794808,

Scopus Author ID: 57196005138

ed.rost@mail.ru

https://orcid.org/0000-0003-3937-8003

Атмачиди

Д. П.

Atmachidi

D. P.

Атмачиди Дмитрий Панаетович - к.м.н., врач-нейрохирург отделения нейроонкологии,

г. Ростов-на-Дону

SPIN: 6800-1457,

AuthorID: 794785,

Scopus Author ID: 57189576376

Dmitriy P. Atmachidi - Cand. Sci. (Med.), neurosurgeon at the department of neuronal oncology,

Rostov-on-Don

SPIN: 6800-1457,

AuthorID: 794785,

Scopus Author ID: 57189576376

atmachidi@yandex.ru

https://orcid.org/0000-0002-6544-6113

Лаптева

Т. О.

Lapteva

T. O.

Лаптева Татьяна Олеговна - заведующая патологоанатомическим отделением,

г. Ростов-на-Дону

SPIN: 2771-3213,

AuthorID: 849370,

Scopus Author ID: 55895197300

Tatiana O. Lapteva - chief of pathology department,

Rostov-on-Don

SPIN: 2771-3213,

AuthorID: 849370,

Scopus Author ID: 55895197300

lto-96@yandex.ru

https://orcid.org/0000-0002-2302-3542

Волошин

М. В.

Voloshin

M. V.

Волошин Марк Витальевич - врач-патологоанатом патоморфологического отделения,

г. Ростов-на-Дону

SPIN: 6122-4084,

AuthorID: 969003,

ResearcherID: С-5601-2018,

Scopus Author ID: 57221474658

Mark V. Voloshin - MD, pathologist at the department of pathomorphology,

Rostov-on-Don

SPIN: 6122-4084,

AuthorID: 969003,

ResearcherID: С-5601-2018,

Scopus Author ID: 57221474658

rnioi-pathology@yandex.ru

https://orcid.org/0000-0001-9331-3353

Еремин

К. С.

Eremin

K. S.

Еремин Константин Станиславович - врач-патологоанатом патологоанатомического отделения,

г. Ростов-на-Дону

SPIN: 9865-0123,

AuthorID: 1150930,

ResearcherID: AIE-7050-2022

Konstantin S. Eremin - MD, pathologist at the pathology department,

Rostov-on-Don

SPIN: 9865-0123,

AuthorID: 1150930,

ResearcherID: AIE-7050-2022

rnioi-pathology@yandex.ru

https://orcid.org/0000-0002-1282-4811

Сухарь

И. А.

Suhar

I. A.

Сухарь Ирина Александровна - врач-патологоанатом патологоанатомического отделения,

г. Ростов-на-Дону

SPIN: 8387-1938,

AuthorID: 1147554

Irina A. Suhar - MD, pathologist at the pathology department,

Rostov-on-Don

SPIN: 8387-1938,

AuthorID: 1147554

rnioi-pathology@yandex.ru

НМИЦ онкологииРоссияNational Medical Research Centre for OncologyRussian Federation

2022

21112022

341425

Copyright © Межевова И.В., Ситковская А.О., Филиппова С.Ю., Шамова Т.В., Тимофеева С.В., Гненная Н.В., Новикова И.А., Харагезов Д.А., Милакин А.Г., Лейман И.А., Статешный О.Н., Росторгуев Э.Е., Атмачиди Д.П., Лаптева Т.О., Волошин М.В., Еремин К.С., Сухарь И.А., 2022

2022

Межевова И.В., Ситковская А.О., Филиппова С.Ю., Шамова Т.В., Тимофеева С.В., Гненная Н.В., Новикова И.А., Харагезов Д.А., Милакин А.Г., Лейман И.А., Статешный О.Н., Росторгуев Э.Е., Атмачиди Д.П., Лаптева Т.О., Волошин М.В., Еремин К.С., Сухарь И.А.

Mezhevova I.V., Sitkovskaya A.O., Filippova S.Y., Shamova T.V., Timofeeva S.V., Gnennaya N.V., Novikova I.A., Kharagezov D.A., Milakin A.G., Leiman I.A., Stateshny O.N., Rostorguev E.E., Atmachidi D.P., Lapteva T.O., Voloshin M.V., Eremin K.S., Suhar I.A.

Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.

This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.

https://www.cancersp.com/jour/article/view/185

Цель исследования

Цель исследования. Тестирование новых химиотерапевтических агентов в трансляционной и биомедицине нуждается в исследованиях на иммортализованных клеточных линиях. Однако такие модели не всегда обладают биологическими свойствами опухоли in situ, в отличие от первичных культур клеток. Первичные культуры клеток рака легкого обладают близкими или идентичными опухолевым клеткам in vivo биологическими, гистологическими и молекулярными характеристиками. Получение коллекций первичных клеточных линий рака легкого является важной задачей в создании различных моделей для доклинических исследований.

Материалы и методы

Материалы и методы. В работе использовали послеоперационные образцы опухоли, полученные от 25 пациентов с впервые выявленным раком лёгкого без предварительного лечения. Для получения первичных культур использовали следующие методы: ферментативной диссоциации в растворе Хэнкса с добавлением 300 ед./мл коллагеназы I (Thermo Fisher Scientific, США), ферментативной диссоциации с использованием набора Brain Tumor Dissotiation Kit (Miltenyi Biotec, Германия) и 150 ед./мл коллагеназы I, а также метод эксплантатов. Для удаления фибробластов использовали следующие методы: применение системы FibrOut™ (CHI Scientific, США), магнитная сепарация фибробластов с использованием Anti-Fibroblast MicroBeads (Miltenyi Biotec, Германия) и метод холодной трипсинизации.

Результаты

Результаты. Получено 15 первичных клеточных культур рака легкого, прошедших нулевой пассаж. В данной работе наиболее эффективным оказался метод ферментативной диссоциации. Инкубирование образцов опухоли легкого с коллагеназой в течение 1 ч. сохраняет жизнеспособность и адгезивную способность клеток. Метод эксплантатов не показал своей эффективности в целях долгосрочного культивирования, отсутствовала миграция клеток опухоли на пластик. Магнитная сепарация, как метод удаления стромальных компонентов фибробластов, показала наибольшую эффективность, сохраняя жизнеспособность клеток опухоли.

Заключение

Заключение. Полученные первичные клеточные культуры рака легкого могут быть использованы для многих задач экспериментальной онкологии: исследования биологических особенностей рака легкого, разработки доклинических моделей исследования новых химиотерапевтических препаратов.

Purpose of the study

Purpose of the study. Testing of new chemotherapeutic agents in translational and biology medicine needs studies on immortalized cell lines. However, such models do not always have the biological properties of a tumor in situ, in contrast to primary cell cultures. Primary cultures of lung cancer cells have biological, morphological and molecular characteristics close or identical to tumor cells in vivo. Obtaining collections of primary lung cancer cell lines is an important task in creating various models for preclinical studies.

Materials and methods

Materials and methods. The materials are represented by postoperative tumor samples obtained from 25 patients with newly diagnosed lung cancer without prior treatment. The following methods were used to obtain primary cultures: enzymatic dissociation in Hanks' solution with the addition of 300 units/ml collagenase I (Thermo Fisher Scientific, USA), enzymatic dissociation using the Brain Tumor Dissoсiation Kit (Miltenyi Biotec, Germany) and 150 units/ml. ml of collagenase I, as well as the method of explants. The following methods were used to remove fibroblasts: the use of the FibrOut™ system (CHI Scientific, USA), magnetic separation of fibroblasts using Anti-Fibroblast MicroBeads (Miltenyi Biotec, Germany), and cold trypsinization.

Results

Results. We have obtained 15 primary lung cancer cell cultures that have passed the zero order passage. In this work, the method of enzymatic dissociation turned out to be the most effective. Incubation of lung tumor samples with collagenase for 1 hour preserves the viability and adhesiveness of the cells. The explant method did not show its effectiveness for long-term cultivation, there was no migration of tumor cells to plastic. Magnetic separation, as a method of removing stromal components of fibroblasts, showed the greatest efficiency, while maintaining the viability of tumor cells.

Conclusion

Conclusion. The obtained primary cell cultures of lung cancer can be used for many tasks of experimental oncology: studies of the biological characteristics of lung cancer, development of preclinical models for the studies on new chemotherapeutic drugs.

первичная клеточная культурарак легкихмеханическая диссоциацияферментативная диссоциацияколлагеназаметод эксплантатовудаление фибробластов

primary cell culturelung cancermechanical dissociationenzymatic dissociationcollagenaseexplant methodfibroblast removal

References1

Злокачественные новообразования в России в 2020 году (заболеваемость и смертность). Под ред. А. Д. Каприна, В. В. Старинского, А. О. Шахзадовой. М.: МНИОИ им. П. А. Герцена – филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России, 2021, 252 с. Доступно по: https://oncology-association.ru/wp-content/uploads/2021/11/zis-2020-elektronnayaversiya.pdf, Дата обращения: 29.10.2022.

Malignant neoplasms in Russia in 2020 (morbidity and mortality). Ed. by A. D. Kaprin, V. V. Starinsky, A. O. Shakhzadova. Moscow: P. A. Herzen Moscow State Medical Research Institute – Branch of the National Medical Research Radiological Center, 2021, 252 p. (In Russ.). Available at: https://oncology-association.ru/wp-content/uploads/2021/11/zis-2020-elektronnaya-versiya.pdf, Accessed: 29.10.2022.

Saab S, Zalzale H, Rahal Z, Khalifeh Y, Sinjab A, Kadara H. Insights Into Lung Cancer Immune-Based Biology, Prevention, and Treatment. Front Immunol. 2020;11:159. https://doi.org/10.3389/fimmu.2020.00159

Leitão de Sousa VM, Carvalho L. Heterogeneity in Lung Cancer. Pathobiology. 2018;85(1–2):96–107. https://doi.org/10.1159/000487440

Leitão de Sousa VM, Carvalho L. Heterogeneity in lung cancer. Pathobiology. 2018;85(1-2):96–107. https://doi.org/10.1159/000487440

Knight SB, Crosbie PA, Balata H, Chudziak J, Hussell T, Dive C. Progress and prospects of early detection in lung cancer. Open Biol. 2017 Sep;7(9):170070. https://doi.org/10.1098/rsob.170070

Li PJ, Roose JP, Jablons DM, Kratz JR. Bioinformatic Approaches to Validation and Functional Analysis of 3D Lung Cancer Models. Cancers (Basel). 2021 Feb 9;13(4):701. https://doi.org/10.3390/cancers13040701

Фрешни Р. Я. Культура животных клеток: практическое руководство. М.: БИНОМ, Лаборатория знаний, 2010, 691 с.

Freshni R Ya. Animal cell culture: a practical guide. M.: BINOM, Laboratory of Knowledge, 2010, 691 p. (In Russ.).

Le H, Seitlinger J, Lindner V, Olland A, Falcoz PE, Benkirane-Jessel N, et al. Patient-Derived Lung Tumoroids-An Emerging Technology in Drug Development and Precision Medicine. Biomedicines. 2022 Jul 12;10(7):1677. https://doi.org/10.3390/biomedicines10071677

Gazdar AF, Girard L, Lockwood WW, Lam WL, Minna JD. Lung cancer cell lines as tools for biomedical discovery and research. J Natl Cancer Inst. 2010 Sep 8;102(17):1310–1321. https://doi.org/10.1093/jnci/djq279

Галимова Э. С., Галагудза М. М. Двухмерные и трехмерные модели культур клеток опухолей in vitro: преимущества и недостатки. Бюллетень сибирской медицины. 2018;17(3):188–196.

Galimova ES, Galagudza MM. Two-dimensional and three-dimensional models of tumor cell cultures in vitro: advantages and disadvantages. Bulletin of Siberian Medicine. 2018;17(3):188–196. (In Russ.).

Кутилин Д. С., Айрапетова А. Г., Анистратов П. А., Пыльцин С. П., Лейман И. А., Карнаухов Н. С. и др. Изменение копийности генов в опухолевых клетках и внеклеточной ДНК у больных аденокарциномой легкого. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2019;167(6):731–738.

Kutilin DS, Airapetova AG, Anistratov PA, Pyltsyn SP, Leyman IA, Karnaukhov NS, et al. Changes in gene replication in tumor cells and extracellular DNA in patients with lung adenocarcinoma. Bulletin of Experimental Biology and Medicine. 2019;167(6):731–738. (In Russ.).

Passaro A, Malapelle U, Del Re M, Attili I, Russo A, Guerini-Rocco E, et al. Understanding EGFR heterogeneity in lung cancer. ESMO Open. 2020 Oct;5(5):e000919. https://doi.org/10.1136/esmoopen-2020-000919

Fidler IJ. Biological heterogeneity of cancer: implication to therapy. Hum Vaccin Immunother. 2012 Aug;8(8):1141–1142. https://doi.org/10.4161/hv.19643

Zheng C, Sun Y hua, Ye X lei, Chen H quan, Ji H bin. Establishment and characterization of primary lung cancer cell lines from Chinese population. Acta Pharmacol Sin. 2011 Mar;32(3):385–392. https://doi.org/10.1038/aps.2010.214

Karekla E, Liao WJ, Sharp B, Pugh J, Reid H, Quesne JL, et al. Ex Vivo Explant Cultures of Non-Small Cell Lung Carcinoma Enable Evaluation of Primary Tumor Responses to Anticancer Therapy. Cancer Res. 2017 Apr 15;77(8):2029–2039. https://doi.org/10.1158/0008-5472.CAN-16-1121

Herreros-Pomares A, Zhou X, Calabuig-Fariñas S, Lee SJ, Torres S, Esworthy T, et al. 3D printing novel in vitro cancer cell culture model systems for lung cancer stem cell study. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl. 2021 Mar;122:111914. https://doi.org/10.1016/j.msec.2021.111914

Herreno A, Sanchez M, Rey L, Mejía J, Cañas A, Moreno O, et al. Primary lung cancer cell culture from Transthoracic needle biopsy samples. Cogent Medicine. 2018 Jul 23;5:1503071. https://doi.org/10.1080/2331205X.2018.1503071

Mitra A, Mishra L, Li S. Technologies for deriving primary tumor cells for use in personalized cancer therapy. Trends in Biotechnology. 2013 Jun;31(6):347–354. https://doi.org/10.1016/j.tibtech.2013.03.006

Филиппова С. Ю., Ситковская А. О., Сагакянц А. Б., Бондаренко Е. С., Ващенко Л. Н., Кечеджиева Э. Э. и др. Выделение опухолевых стволовых клеток рака молочной железы с применением коллагеназы. Современные проблемы науки и образования. 2019;(6):147.

Filippova SYu, Sitkovskaya AO, Sagakyants AB, Bondarenko ES, Vashchenko LN, Kechedzhieva EE, et al. Isolation of tumor stem cells of breast cancer using collagenase. Modern problems of science and education. 2019;(6):147. (In Russ.).

Seo J, Park SJ, Kim J, Choi SJ, Moon SH, Chung HM. Effective method for the isolation and proliferation of primary lung cancer cells from patient lung tissues. Biotechnol Lett. 2013 Aug;35(8):1165–1174. https://doi.org/10.1007/s10529-013-1189-3

Kisselbach L, Merges M, Bossie A, Boyd A. CD90 Expression on human primary cells and elimination of contaminating fibroblasts from cell cultures. Cytotechnology. 2009 Jan;59(1):31–44. https://doi.org/10.1007/s10616-009-9190-3

Dai Y, Guo S, Huang S, Zhang J, Zhang Z. Summary of primary culture of human lung cancer cells. Austin J Cancer Clin Res. 2018;5(1):1083.

Boucherit N, Gorvel L, Olive D. 3D Tumor Models and Their Use for the Testing of Immunotherapies. Front Immunol. 2020;11:603640. https://doi.org/10.3389/fimmu.2020.603640

Green ML, Breite AG, Beechler CA, Dwulet FE, McCarthy RC. Effectiveness of different molecular forms of C. histolyticum class I collagenase to recover islets. Islets. 2017 Nov 2;9(6):177–181. https://doi.org/10.1080/19382014.2017.1365996

Powley IR, Patel M, Miles G, Pringle H, Howells L, Thomas A, et al. Patient-derived explants (PDEs) as a powerful preclinical platform for anti-cancer drug and biomarker discovery. Br J Cancer. 2020 Mar;122(6):735–744. https://doi.org/10.1038/s41416-019-0672-6

Шамова Т. В., Ситковская А. О., Росторгуев Э. Е., Кузнецова Н. С., Кавицкий С. Э. Получение первичных клеточных линий глиальных опухолей. Пермский медицинский журнал. 2020;37(5):79–89.

Shamova TV, Sitkovskaya AO, Rastorguev EE, Kuznetsova NS, Kavitsky SE. Obtaining primary cell lines of glial tumors. Perm Medical Journal. 2020;37(5):79–89. (In Russ.).

Межевова И. В., Шамова Т. В., Ситковская А. О., Шевченко А. Н., Швырев Д. А., Филатова Е. В. и др. Опыт создания первичной культуры рака предстательной железы in vitro. Современные проблемы науки и образования. 2020;5:91.

Mezhevova IV, Shamova TV, Sitkovskaya AO, Shevchenko AN, Shvyrev DA, Filatova EV, et al. The experience of creating a primary culture of prostate cancer in vitro. Modern Problems of Science and Education. 2020;5:91. (In Russ.).

Gentles AJ, Hui ABY, Feng W, Azizi A, Nair RV, Bouchard G, et al. A human lung tumor microenvironment interactome identifies clinically relevant cell-type cross-talk. Genome Biol. 2020 May 7;21(1):107. https://doi.org/10.1186/s13059-020-02019-x

Serebriiskii I, Castelló-Cros R, Lamb A, Golemis EA, Cukierman E. Fibroblast-derived 3D matrix differentially regulates the growth and drug-responsiveness of human cancer cells. Matrix Biol. 2008 Jul;27(6):573–585. https://doi.org/10.1016/j.matbio.2008.02.008

Xu Y, Hu YD, Zhou J, Zhang MH. Establishing a lung cancer stem cell culture using autologous intratumoral fibroblasts as feeder cells. Cell Biol Int. 2011 May;35(5):509–517. https://doi.org/10.1042/CBI20100473

Yan X, Zhou L, Wu Z, Wang X, Chen X, Yang F, et al. High throughput scaffold-based 3D micro-tumor array for efficient drug screening and chemosensitivity testing. Biomaterials. 2019 Apr;198:167–179.

Wu R. Growth of Human Lung Tumor Cells in Culture. 2005, 1–21 p. https://doi.org/10.1002/0471722782.ch1

Tiran V, Lindenmann J, Brcic L, Heitzer E, Stanzer S, Tabrizi-Wizsy NG, et al. Primary patient-derived lung adenocarcinoma cell culture challenges the association of cancer stem cells with epithelial-to-mesenchymal transition. Sci Rep. 2017 Aug 30;7(1):10040. https://doi.org/10.1038/s41598-017-09929-0

The authors declare that there are no conflicts of interest present.