Филиппова Светлана Юрьевна – научный сотрудник лаборатории клеточных технологий ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID:
Svetlana Yu. Filippova – Researcher, Laboratory of Cell Technologies, National Medical Research Centre for Oncology, Rostov-on-Don, Russian Federation
ORCID:
Аушева Татьяна Валерьевна – к.м.н., врач-онколог отделения опухолей костей, кожи, мягких тканей и молочной железы ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID:
Tatiana V. Ausheva – Cand. Sci. (Med.), MD, oncologist at the Department of Tumors of Bones, Skin, Soft Tissues and Breast, National Medical Research Centre for Oncology, Rostov-on-Don, Russian Federation
ORCID:
Межевова Ирина Валентиновна – младший научный сотрудник лаборатории клеточных технологий ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID:
Irina V. Mezhevova – Junior Researcher, Laboratory of Cell Technologies, National Medical Research Centre for Oncology, Rostov-on-Don, Russian Federation
ORCID:
Чембарова Татьяна Владимировна – младший научный сотрудник лаборатории клеточных технологий ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID:
Tatiana V. Chembarova – Junior Researcher, Laboratory of Cell Technologies, National Medical Research Centre for Oncology, Rostov-on-Don, Russian Federation
ORCID:
Гненная Надежда Владимировна – младший научный сотрудник лаборатории клеточных технологий ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID:
Nadezhda V. Gnennaya – Junior Researcher, Laboratory of Cell Technologies, National Medical Research Centre for Oncology, Rostov-on-Don, Russian Federation
ORCID:
Новикова Инна Арнольдовна – д.м.н., доцент, заместитель генерального директора по науке ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID:
Inna A. Novikova – Dr. Sci. (Med.), Associate Professor, Deputy General Director for Science, National Medical Research Centre for Oncology, Rostov-on-Don, Russian Federation
ORCID:
Максимов Алексей Юрьевич – д.м.н., профессор, заместитель генерального директора по перспективным научным разработкам ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID:
Aleksey Yu. Maksimov – Dr. Sci. (Med.), Professor, Deputy CEO for Advanced Scientific Research, National Medical Research Centre for Oncology, Rostov-on-Don, Russian Federation
ORCID:
Алиханова Сарижат Сурхаевна – аспирант ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID:
Sarizhat S. Alihanova – PhD student, National Medical Research Centre for Oncology, Rostov-on-Don, Russian Federation
ORCID:
Еремин Константин Станиславович – врач-патологоанатом патологоанатомического отделения ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID:
Konstantin S. Eremin – MD, pathologist, Department of Pathology, National Medical Research Centre for Oncology, Rostov-on-Don, Russian Federation
ORCID:
Ватулина Анастасия Сергеевна – врач клинической лабораторной диагностики, врач-лабораторный генетик ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID:
Anastasia S. Vatulina – MD, clinical laboratory diagnostics physician, laboratory geneticist, National Medical Research Centre for Oncology, Rostov-on-Don, Russian Federation
ORCID:
Снежко Александр Владимирович – д.м.н., доцент кафедры онкологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID:
Aleksandr V. Snezhko – Dr. Sci. (Medicine), Associate Professor of the Department of Oncology, National Medical Research Centre for Oncology, Rostov-on-Don, Russian Federation
ORCID:
Коновальчик Мария Алексеевна – к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории ИФТ ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID:
Mariya A. Konovalchik – Cand. Sci. (Biology), Senior Researcher of Tumor Immunophenotyping Laboratory, National Medical Research Centre for Oncology, Rostov-on-Don, Russian Federation
ORCID:
Саркомы мягких тканей (СМТ) часто резистентны к лечению. Поиск новых противоопухолевых соединений в отношении СМТ оста‑ ется актуальной задачей.
Цель исследования. Изучить чувствительность к основному метаболиту альбендазола сульфоксида (рикобендазол) и доксорубицину первичных культур СМТ различных гистологических подтипов.
Материалы и методы. Первичные культуры были получены из образцов СМТ, полученных от ранее не леченых пациентов в ходе хирургического удаления опухоли. В качестве исследуемых веществ использовали Риказол® (НИТА-ФАРМ, Россия) и Доксорубицин-ЛЭНС® (ВЕРОФАРМ, Россия). Чувствительность к рикобендазолу и доксорубицину проверяли с использованием МТТ-теста после культивирования с рикобендазолом в серии двукратных разведений от 35,5 мкмоль/л до 0,0347 мкмоль/л или доксорубицином от 10 мкмоль/л до 0,009 мкмоль/л в течение 72 ч. Для изучения морфологических изменений клеточных ядер клетки культивировали с 2 мкмоль/л рикабендазола в течение 72 ч, после чего проводили окрашивание 1 мкг/мл Hoechst 33342 (Life Technologies, США), и фотографировали в цифровом автоматическом микроскопе LionHeart FX (BioTek Instruments Inc., США).
Результаты. Получены 4 первичные культуры сарком. Культуры SAR‑1 и SAR‑4 характеризовались наиболее быстрым ростом (вре‑ мя удвоения 38 и 27 ч соответственно). Наиболее медленным ростом характеризовалась культура SAR‑2 (время удвоения 156 ч), в культуре SAR‑3 время удвоения составило 45 ч. По данным МТТ-теста для рикобендазола для SAR‑1 IC50–4,54 ± 1,2 мкмоль/л, для SAR‑3–3,31 ± 0,7 мкмоль/л и для SAR‑4–1,51 ± 0,2 мкмоль/л соответственно, медленно делящаяся SAR‑2 оказалась нечувствительной к рикобендазолу. Цитостатическая активность доксорубицина была выше, чем у рикобендазола. Культура SAR‑2 была наименее чувствительной (IC50 определить не удалось), а SAR‑4 (IC50 SAR‑4 = 0,16 ± 0,01 мкмоль/л) наиболее чувствительной к действию доксору‑ бицина. Значение IC50 SAR‑1 = 0,64 ± 0,02 мкмоль/л и IC50 SAR‑3 = 1,8 ± 0,1 мкмоль/л. Воздействие рикобендазола вызвало выраженные нарушения в ядрах в культурах SAR‑1 и SAR‑4, в SAR‑2 и SAR‑3 они были менее выражены.
Заключение. Рикобендазол оказал цитостатическое действие на первичные культуры СМТ, характеризующиеся быстрым клеточным ростом, но активность была ниже, чем у доксорубицина. Изменения в морфологии клеток и ядер свидетельствовали о вероятных нарушениях в работе веретена деления и цитоскелета, происходящих под действием данного соединения. Особенный интерес для дальнейшего исследования представляет комбинирование рикобендазола с таксанами и другими ингибиторами тубулинов.
Soft tissue sarcomas (STS) are often resistant to treatment. The search for new antitumor compounds against STS remains an urgent task.
Purpose of the study. To assess the sensitivity of primary STS cultures of various histological subtypes to albendazole sulfoxide (ricobendazole) and doxorubicin, the primary metabolite of albendazole.
Materials and methods. STS tumor samples were used. The enzymatic dissociation method was used using 300 units/ml collagenase I (Thermo Fisher Scientific, USA). Ricasol® (NITA-PHARM, Russia) and Doxorubicin-LENS® (VEROPHARM, Russia) were used as test substances. Sensitivity to ricobendazole and doxorubicin was tested using the MTT test. The cultures were seeded in a 96‑well plate at 7,000 cells in DMEM medium with 10 % FSC added. After 24 h, the medium was replaced with PPS with ricobendazole in a series of two-fold dilutions from 35.5 μmol/l to 0.0347 μmol/l or doxorubicin from 10 μmol/l to 0.009 μmol/l. After 72 hours of incubation, the MTT test was performed. The cells were seeded in a 24‑well plate and cultured in PPS with 2 μmol/l ricabendazole for 72 h. Hoechst 33342 dye (Life Technologies, USA) was added to the culture at a concentration of 1 μg/ml, and photographs were taken using a LionHeart FX digital automatic microscope (BioTek Instruments Inc., USA).
Results. Four primary sarcoma cultures were obtained: SAR‑1, SAR‑2, SAR‑3, and SAR‑4. SAR-1 and SAR-4. Cultures demonstrated the most rapid growth, with doubling times of 38 and 27 hours, respectively. The slowest proliferation was observed in the SAR-2 culture (doubling time 156 hours), while SAR-3 showed a doubling time of 45 hours. According to the MTT assay, the IC50 values for ricobendazole were 4.54 ± 1.2 μmol/L for SAR-1, 3.31 ± 0.7 μmol/L for SAR-3, and 1.51 ± 0.2 μmol/L for SAR-4, whereas the slowly dividing SAR-2 culture proved to be insensitive to ricobendazole. The cytostatic activity of doxorubicin was higher than that of ricobendazole. The SAR‑2 culture was the least sensitive (IC50 could not be determined), and SAR‑4 (IC50 SAR‑4 = 0.16 ± 0.01 μmol/l) was the most sensitive to the action of doxorubicin. The IC50 value of SAR‑1 = 0.64 ± 0.02 μmol/l and IC50 SAR‑3 = 1.8 ± 0.1 μmol/l. The effect of ricobendazole caused pronounced disturbances in the nuclei of SAR‑1 and SAR‑4 cultures, in SAR‑2 and SAR‑3 they were less pronounced.
Conclusion. Ricobenzale had a cytostatic effect on primary STS cultures characterized by rapid cell growth, but the activity was lower than that of doxorubicin. Changes in the morphology of cells and nuclei indicated probable disturbances in the functioning of the spindle and cytoskeleton occurring under the action of this compound. Of particular interest for further research is the combination of ricobendazole with taxanes and other tubulin inhibitors.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.