cancerspЮжно-Российский онкологический журнал/ South Russian Journal of CancerSouth Russian Journal of Cancer2686-9039АНО "Перспективы онкологии"10.37748/2687-0533-2020-1-3-3cancersp-71Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESМорфологические и иммунофенотипические особенности моноклональной популяции В-лимфоцитов при хроническом лимфолейкозеMorphological and immunofenotypic features of the monoclonal population of B-lymphocytes in chronic lymphocytic leukemiahttps://orcid.org/0000-0002-4222-1579ГуськоваН. К.GuskovaN. K.

Гуськова Наиля Катифовна – к.б.н., заведующая клинико-диагностической лабораторией. SPIN: 5407-6285, AuthorID: 306979

344037, г. Ростов-на-Дону, ул. 14-я линия, д. 63

Nailya K. Guskova – Cand. Sci. (Biol.), head of the clinical and diagnostic laboratory. SPIN: 5407-6285

63 14 line str., Rostov-on-Don 344037

guskova.nailya@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-6762-0835СелютинаО. Н.SelyutinaO. N.

Селютина Олеся Николаевна – биолог клинико-диагностической лаборатории. SPIN: 4347-0302, AuthorID: 759134

344037, г. Ростов-на-Дону, ул. 14-я линия, д. 63

Olesya N. Selyutina – biologist of the clinical and diagnostic laboratory. AuthorID: 759134

63 14 line str., Rostov-on-Don 344037

https://orcid.org/0000-0002-6496-9641НовиковаИ. А.NovikovaI. A.

Новикова Инна Арнольдовна – к.м.н., заместитель генерального директора по науке. SPIN: 4810-2424, AuthorID: 726229

344037, г. Ростов-на-Дону, ул. 14-я линия, д. 63

Inna A. Novikova – Cand. Sci. (Med.), deputy general director for science. AuthorID: 726229

63 14 line str., Rostov-on-Don 344037

https://orcid.org/0000-0002-1397-837XМаксимовА. Ю.MaksimovA. Yu.

Максимов Алексей Юрьевич – д.м.н., профессор, заместитель генерального директора по перспективным научным разработкам. SPIN: 7322-5589, AuthorID: 710705

344037, г. Ростов-на-Дону, ул. 14-я линия, д. 63

Aleksei Yu. Maksimov – Dr. Sci. (Med.), professor, deputy general director for advanced scientific developments. SPIN: 7322-5589, AuthorID: 710705

63 14 line str., Rostov-on-Don 344037

https://orcid.org/0000-0003-3336-9202НоздричеваА. С.NozdrichevaA. S.

Ноздричева Анастасия Сергеевна – биолог клинико-диагностической лаборатории

344037, г. Ростов-на-Дону, ул. 14-я линия, д. 63

Anastasiya S. Nozdricheva – biologist of the clinical and diagnostic laboratory

63 14 line str., Rostov-on-Don 344037

https://orcid.org/0000-0003-2569-9922АбакумоваС. В.AbakumovaS. V.

Абакумова Светлана Владимировна – биолог клинико-диагностической лаборатории

344037, г. Ростов-на-Дону, ул. 14-я линия, д. 63

Svetlana V. Abakumova – biologist of the clinical and diagnostic laboratory

63 14 line str., Rostov-on-Don 344037

ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава РоссииРоссияNational Medical Research Centre for Oncology of the Ministry of Health of RussiaRussian Federation202027082020132735Copyright © Гуськова Н.К., Селютина О.Н., Новикова И.А., Максимов А.Ю., Ноздричева А.С., Абакумова С.В., 20202020Гуськова Н.К., Селютина О.Н., Новикова И.А., Максимов А.Ю., Ноздричева А.С., Абакумова С.В.Guskova N.K., Selyutina O.N., Novikova I.A., Maksimov A.Y., Nozdricheva A.S., Abakumova S.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.cancersp.com/jour/article/view/71Цель исследования

Цель исследования. Оценить особенности морфологических и иммунофенотипических характеристик лимфоидной популяции с различной рестрикцией легких цепей иммуноглобулинов у пациентов с хроническим лимфолейкозом (ХЛЛ).

Материалы и методы

Материалы и методы. Обследованы 30 больных ХЛЛ (20 мужчин и 10 женщин) в возрасте 47–79 лет. Выполнены общеклинический анализ крови (SysmexXE 2100, Япония), морфологическое исследование костного мозга (BioVision; Micros, Австрия), иммунофенотипирование костного мозга и периферической крови методом проточной цитофлуориметрии (Navios10/3, Beckman Coulter, США). В-клеточная клональность устанавливалась обнаружением рестрикции легких цепей поверхностных иммуноглобулинов kappa или lambda. Проведен морфологический анализ лимфоцитов, различающихся по экспрессии легких цепей поверхностных иммуноглобулинов: kappa (k) — I группа (22 чел. — 73,3%), lambda (λ) — II группа (8 чел. — 26,7%).

Результаты

Результаты. Определение типов клеток по значениям прямого (FSC) и бокового (SSC) светорассеяния при иммунофенотипировании образцов периферической крови и костного мозга показало, что у больных I группы (CD19k+/CD5+/CD23+) на диаграмме светорассеяния лимфоидная популяция имела низкие показатели параметров: по шкале FSC — от 200 до 400, по SSC — от 10 до 160 единиц, что указывает на морфологическую однородность клеток. Во II группе (CD19λ+/CD5+/CD23+), напротив, на скетограмме светорассеяния лимфоидная зона была неоднородна и растянута: по шкале FSC — от 200 до 1000, по SSC — от 10 до 400 единиц, что свидетельствует о морфологическом полиморфизме клеток. Отмечены различия и в экспрессии общелейкоцитарного антигена CD45. В I группе экспрессия выше: популяция В-лимфоцитов по интенсивности флуоресценции находится на точечном графике по шкале CD45 во второй половине третьей декады и в четвертой декаде — правее, чем во II-й группе, в которой В-лимфоциты лежат в третьей декаде. Данные свидетельствуют, что популяция CD19k+/CD5+/CD23+ представлена зрелыми клетками, а популяция CD19λ+/ CD5+/CD23+ — менее зрелыми и/или промежуточными формами. Значительные морфологические различия популяций лимфоцитов отмечены и при микроскопическом исследовании препаратов крови и костного мозга.

Заключение

Заключение. Установленные иммунофенотипические и морфологические различия лимфоидных популяций, экспрессирующих либо kappa-, либо lambda- легкие цепи иммуноглобулинов, важны для выделения групп риска среди больных с биологически разнородными вариантами хронического лимфолейкоза.

Purpose of the study

Purpose of the study. To evaluate the features of morphological and immunophenotypic characteristics of the lymphoid population with different restriction of light chains of immunoglobulins in patients with chronic lymphocytic leukemia (CLL).

Materials and methods

Materials and methods. The study included 30 CLL patients aged 47–79 years (20 men and 10 women). All patients underwent a General clinical blood test (SysmexXE 2100, Japan), morphological examination of the bone marrow (BioVision; Micros, Austria), immunophenotyping of bone marrow and peripheral blood by flow cytofluorometry (Navios10/3, Beckman Coulter, USA). B-cell clonality established by detection of restriction of light chains of surface immunoglobulins kappa or lambda. Morphological analysis of lymphocytes that differ in the expression of light chains of surface immunoglobulins: kappa (k) — group I (22 people — 73,3%), lambda (λ) — group II (8 people — 26,7%).

Results

Results. Determination of cell types by values of direct (FSC) and lateral (SSC) light scattering during immunophenotyping of peripheral blood and bone marrow samples showed that in patients of group I (CD19k+/CD5+/CD23+) on the light scattering diagram, the lymphoid population had low parameters: on the FSC scale — from 200 to 400, on the SSC — from 10 to 160 units, which indicates morphological uniformity of cells. In group II (CD19λ+/CD5+/CD23+), on the contrary, on the light scattering sketogram, the lymphoid zone was heterogeneous and stretched: on the FSC scale — from 200 to 1000, on the SSC — from 10 to 400 units, which indicates morphological polymorphism of cells. There were also differences in the expression of the common leukocyte antigen CD45. In group I, the expression is higher: the population of B-lymphocytes in terms of fluorescence intensity is on the dot graph on the CD45 scale in the second half of the third decade and in the fourth decade — to the right, than in group II, in which B-lymphocytes lie in the third decade. The data indicate that the CD19k+/CD5+/CD23+ population is represented by Mature cells, while the Cd19k+/CD5+/CD23+ population is represented by less Mature and / or intermediate forms. Significant morphological differences in lymphocyte populations were also observed in microscopic studies of blood and bone marrow preparations.

Conclusion

Conclusion. The established immunophenotypic and morphological differences in lymphoid populations expressing either kappa — or lambda-light chains of immunoglobulins may be important for identifying risk groups among patients with biologically heterogeneous variants of chronic lymphocytic leukemia.

хронический лимфолейкозморфологические и иммунофенотипические особенностикаппа/лямбда легкие цепи иммуноглобулиновпроточная цитофлуориметрияобщелейкоцитарный антигенCD-антигеныchronic lymphocytic leukemiamorphological and immunophenotypic featureskappa / lambda light chains of immunoglobulinsflow cytofluorimetrygeneral leukocyte antigenCD antigensReferencesВойцеховский В.В., Заболотских Т.В., Целуйко С.С., Ландышев Ю.С., Григоренко А.А. Хронический лимфолейкоз. Благовещенск, 2015, 178.Voitsekhovskii VV, Zabolotskikh TV, Tseluiko SS, Landyshev YuS, Grigorenko AA. Chronic lymphocytic leukemia. Blagoveshchensk, 2015, 178. (In Russian).Стадник Е.А., Стругов В.В., Вирц Ю.В., Зарицкий А.Ю. Хронический Лимфолейкоз. Рекомендации по диагностике и лечению. Бюллетень федерального центра сердца, крови и эндокринологии им. В. А. Алмазова. 2012;(6):5–15.Stadnik EA, Strugov VV, Virts YuV, Zaritskey AYu. Guideline for diagnosis and first-line treatment in cll. Bulletin of the Almazov Federal center for heart, blood and endocrinology. 2012;(6):5–15. (In Russian).Войцеховский В.В., Ландышев Ю.С., Есенин В.В., Скрипкина Н.С., Есенина Т.В. Некоторые аспекты диагностики и лечения B-клеточного хронического лимфолейкоза. Сибирский медицинский журнал (Иркутск). 2007; 68(1):72–75.Voitsekhovskii VV, Landyshev YuS, Esenin VV, Skripkina NS, Esenina TV. Some aspects of diagnosis and treatment of B-cell chronic lymphocytic leukemia. Siberian Medical Journal (Irkutsk). 2007;68(1):72–75. (In Russian).Bennet JM, Catovsky D, Daniel MT, Flandrin G, Galton DA, Gralnick HR, et al. Proposals for the classification of chronic (mature) B and T lymphoid leukaemias. FrenchAmerican- British (FAB) Cooperative Group. J Clin Pathol. 1989 Jun;42(6):567–584. https://doi.org/10.1136/jcp.42.6.567Bennet JM, Catovsky D, Daniel MT, Flandrin G, Galton DA, Gralnick HR, et al. Proposals for the classification of chronic (mature) B and T lymphoid leukaemias. French-AmericanBritish (FAB) Cooperative Group. J Clin Pathol. 1989 Jun;42(6):567–584. https://doi.org/10.1136/jcp.42.6.567Шибинская А.В. Иммунологическая характеристика морфологических вариантов В-клеточного хронического лимфолейкоза: Дисс. … канд. мед. наук. М., 2010; 122 с.Shibinskaya AV. Immunological characteristics of morphological variants of B-cell chronic lymphocytic leukemia. Dissertation. Мoscow, 2010, 122 p. (In Russian).Кравченко Д.В., Свирновский А.И. Хронический лимфоцитарный лейкоз: клиника, диагностика, лечение. Гомель: ГУ «РНПЦ РМ и ЭЧ», 2017, 117 с.Kravchenko DV, Svirnovsky AI. Chronic lymphocytic leukemia: clinic, diagnosis, treatment. Gomel: GU "RNPC RM and EC", 2017, 117 p.Craig FE, Foon KA. Flow cytometric immunophenotyping for hematologic neoplasms. Blood. 2008 Apr 15;111(8):3941–3967. https://doi.org/10.1182/blood-2007–11–120535Craig FE, Foon KA. Flow cytometric immunophenotyping for hematologic neoplasms. Blood. 2008 Apr 15;111(8):39413967. https://doi.org/10.1182/blood-2007–11–120535Катаева Е.В., Голенков А.К., Митина Т.А., Клинушкина Е.Ф., Трифонова Е.В., Высоцкая Л.Л. и др. Клинические аспекты определения свободных легких цепей иммуноглобулинов сыворотки крови у больных хроническим лимфолейкозом. Гематология и трансфузиология. 2017;62(3):153–157. https://doi.org/10.18821/0234–5730–2017–62–3–153–157Kataeva EV, Golenkov AK, Mitina TA, Klinushkina EF, Trifonova EV, Vysotskaya LL, et al. Clinical aspects of determining free light chains of serum immunoglobulins in patients with chronic lymphocytic leukemia. Hematology and Transfusiology. 2017;62(3):153–157. https://doi.org/10.18821/0234–5730–2017–62–3–153–157Maurer MJ, Cerhan JR, Katzmann JA, Link BK, Allmer C, Zent CS, et al. Monoclonal and polyclonal serum free light chains and clinical outcome in chronic lymphocytic leukemia. Blood. 2011 Sep 8;118(10):2821–2826. https://doi.org/10.1182/blood-2011–04–349134Maurer MJ, Cerhan JR, Katzmann JA, Link BK, Allmer C, Zent CS, et al. Monoclonal and polyclonal serum free light chains and clinical outcome in chronic lymphocytic leukemia. Blood. 2011 Sep 8;118(10):2821–2826. https://doi.org/10.1182/blood-2011–04–349134Katzman JA, Clark RJ, Abraham RS, Bryant S, Lymp JF, Bradwell AR, et al. Serum reference intervals and diagnostic ranges for free kappa and free lambda immunoglobulin light chains: relative sensitivity for detection of monoclonal light chains. Clin Chem. 2002 Sep; 48(9):1437–1444.Katzman JA, Clark RJ, Abraham RS, Bryant S, Lymp JF, Bradwell AR, et al. Serum reference intervals and diagnostic ranges for free kappa and free lambda immunoglobulin light chains: relative sensitivity for detection of monoclonal light chains. Clin Chem. 2002 Sep;48(9):1437–1444.Pratt G, Harding S, Holder R, Fegan C, Pepper C, Oscier D, et al. Abnormal serum free light chain ratios are associated with poor survival and may reflect biological subgroups in patients with chronic lymphocytic leukaemia. Br J Haematol. 2009 Jan;144(2):217–222. https://doi.org/10.1111/j.1365–2141.2008.07456.xPratt G, Harding S, Holder R, Fegan C, Pepper C, Oscier D, et al. Abnormal serum free light chain ratios are associated with poor survival and may reflect biological subgroups in patients with chronic lymphocytic leukaemia. Br J Haematol. 2009 Jan;144(2):217–222. https://doi.org/10.1111/j.1365–2141.2008.07456.xMaurer MJ, Micallef INM, Cerhan JR, Katzmann JA, Link BK, Colgan JP, et al. Elevated serum free light chains are associated with event-free and overall survival in two independent cohorts of patients with diffuse large B-cell lymphoma. J Clin Oncol. 2011 Apr 20;29(12):1620–1626. https://doi.org/10.1200/JCO.2010.29.4413Maurer MJ, Micallef INM, Cerhan JR, Katzmann JA, Link BK, Colgan JP, et al. Elevated serum free light chains are associated with event-free and overall survival in two independent cohorts of patients with diffuse large B-cell lymphoma. J Clin Oncol. 2011 Apr 20;29(12):1620–1626. https://doi.org/10.1200/JCO.2010.29.4413Marti GE, Rawstron AC, Ghia P, Hillmen P, Houlston RS, Kay N, et al. Diagnostic criteria for monoclonal B-cell lymphocytosis. Br J Haematol. 2005 Aug;130(3):325–332. https://doi.org/10.1111/j.1365–2141.2005.05550.xMarti GE, Rawstron AC, Ghia P, Hillmen P, Houlston RS, Kay N, et al. Diagnostic criteria for monoclonal B-cell lymphocytosis. Br J Haematol. 2005 Aug;130(3):325–332. https://doi.org/10.1111/j.1365–2141.2005.05550.xHallek M, Cheson BD, Catovsky D, Caligaris- Cappio F, Dighiero G, Döhner H, et al. Guidelines for the diagnosis and treatment of chronic lymphocytic leukemia: a report from the International Workshop on Chronic Lymphocytic Leukemia updating the National Cancer Institute-Working Group 1996 guidelines. Blood. 2008 Jun 15;111(12):5446–5456. https://doi.org/10.1182/blood-2007–06–093906Hallek M, Cheson BD, Catovsky D, Caligaris-Cappio F, Dighiero G, Döhner H, et al. Guidelines for the diagnosis and treatment of chronic lymphocytic leukemia: a report from the International Workshop on Chronic Lymphocytic Leukemia updating the National Cancer Institute-Working Group 1996 guidelines. Blood. 2008 Jun 15;111(12):5446–5456. https://doi.org/10.1182/blood-2007–06–093906Гаврилина О.А., Звонков Е.Е., Судариков А.Б., Никулина Е.Е., Сидорова Ю.В., Бидерман Б.В. и др. Детекция В-клеточной клональности в костном мозге при диффузной В-крупноклеточной лимфоме. Гематология и трансфузиология. 2015;60(2):26–31.Gavrilina OA, Zvonova EE, Sudarikov AB, Nikulina EE, Sidorova YuV, Biderman BV, et al. Detection of bone marrow B-cell clonality in diffuse large B-cell lymphoma. Hematology and Transfusiology. 2015;60(2):26–31.Луговская С.А., Почтарь М.Е. Гематологический атлас. 4е издание, дополнительное. М.: ООО «Издательство «Триада», 2016, 434 с.Lugovskaya SA, Pochtar ME. Hematological Atlas. 4th edition, additional. Moscow: Triada Publishing house, 2016, 434 p.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.