Влияние онколитических штаммов новой неклассифицированной группы ротавирусов человека на лимфоциты периферической крови

Цель исследования. Оценка цитотоксического действия штаммов RVK100 и RVK228 новой неклассифицированной группы ротавирусов человека на мононуклеарные клетки периферической крови человека in vitro.
Материалы и методы. В качестве материала для исследования использовали мононуклеарные клетки периферической крови здорового донора. На клетки воздействовали двумя штаммами RVK100 и RVK228 в течение 24 и 48 часов. Цитотоксичность тестируемых вирусов оценивали с помощью теста Colorimetric Cell Viability Kit I (WST-8) (PromoCell, Германия). Анализ субпопуляционного состава лимфоцитов оценивали на проточном цитофлуориметре FACSCantoII (BD, США) с использованием панели моноклональных антител к человеческим антигенам: CD3, CD4, CD8, CD16/56, CD19, CD45, CD38, HLA-DR.
Результаты. По данным теста на жизнеспособность не было обнаружено достоверно значимого снижения количества живых клеток в образцах с добавлением вирусов по сравнению с контролем. Напротив, после 48 часов культивирования в образцах с добавлением RVK228 количества живых клеток было достоверно больше, чем в контроле. Исследование субпопуляционного состава лимфоцитов показало относительное увеличение количества маркеров ранней активации на Т-клетках в образцах с вирусами, которое также было более выражено в образцах с добавлением RVK228.
Заключение. Исследуемые штаммы ротавирусов не оказывают цитотоксического действия на мононуклеарные клетки периферической крови человека. При этом штамм RVK228, вероятно, обладает способностью к активации лимфоцитов.

1. Naghavi M., Abajobir A.A., Abbafati C., Abbas K.M., Abd-Allah F., Abera S.F, Aboyans V., et al. Global, regional, and national age-sex specific mortality for 264 causes of death, 1980-2016: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2016. Lancet. 2017;390(10100):1151-1210. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(17)32152-9.

2. Liang M. Oncorine, the world first oncolytic virus medicine and its update in China. Curr. Cancer Drug Targets. 2018;18(2):171-176. https://doi.org/10.2174/1568009618666171129221503.

3. Conry R.M., Westbrook B., McKee S., Norwood T.G. Talimogene laherparepvec: first in class oncolytic virotherapy. Hum. Vaccin. Immunother. 2018;14(4):839-846. https://doi.org/10.1080/21645515.2017.1412896.

4. Mesev E.V., LeDesma R.A., Ploss A. Decoding type I and III interferon signalling during viral infection. Nat Microbiol. 2019;4(6):914-924. https://doi.org/10.1038/s41564-019-0421-x.

5. Dyer A., Schoeps B., Frost S., Jakeman P., Scott E.M., Freedman J., Jacobus E.J., Seymour L.W. Antagonism of glycolysis and reductive carboxylation of glutamine potentiates activity of oncolytic adenoviruses in cancer cells. Cancer Res. 2019;79(2):331-345. https://doi.org/10.1158/0008-5472.CAN-18-1326.

6. Russell S.J., Peng K.W., Bell J.C. Oncolytic virotherapy. Nat Biotechnol. 2012;30(7):658-70. https://doi.org/10.1038/nbt.2287.

7. Колпаков С.А., Колпакова Е.П. Новая группа ротавирусов человека семейства Reoviridae. Живые и биокосные системы. 2014;10:6.

8. Колпаков С.А., Колпакова Е.П., Златник Е.Ю. Штамм новой группы ротавирусов семейства Reoviridae препятствует перевиваемости и росту опухоли яичника крыс в эксперименте. Злокачественные опухоли. 2019;9(3):С. 135.

9. Златник Е.Ю., Колпаков С.А., Колпакова Е.П., Ситковская А.О., Шульгина О.Г., Непомнящая Е.М. Исследование онколитического действия новой неклассифицированной группы ротавирусов человека семейства Reoviridae на эпидермоидную карциному in vivo. Белые ночи 2020: тезисы VI Петербургского международного онкологического форума, Санкт-Петербург, 25-28 июня 2020 года. - Санкт-Петербург: Вопросы онкологии, 2020:138.

10. Ситковская А.О., Филиппова С.Ю., Златник Е.Ю., Колпаков С.А., Колпакова Е.П., Межевова И.В., Бондаренко Е.С., и др. Цитотоксическое действие неклассифицированных ротавирусов группы К на культуры клеток T98G и U87MG in vitro. Цитология. 2020;62(3):189-200. https://doi.org/10.31857/S0041377120030062.

11. Ситковская А.О., Златник Е.Ю., Филиппова С.Ю., Бондаренко Е.С., Ващенко Л.Н., Кечеджиева Э.Э., Дашкова И.Р., и др. Влияние интерлейкинов 2, 7, 15 на пролиферацию натуральных киллеров in vitro. Российский биотерапевтический журнал. 2021;20(1):56-66. https://doi.org/10.17650/1726-9784-2021-20-1-56-66.

12. Yasukawa M, Nakagomi O, Kobayashi Y. Rotavirus induces proliferative response and augments non-specific cytotoxic activity of lymphocytes in humans. Clin Exp Immunol. 1990;80(1):49-55. https://doi.org/10.1111/j.1365-2249.1990.tb06440.x.

13. Mesa M.C., Rodríguez L.S., Franco M.A., Angel J. Interaction of rotavirus with human peripheral blood mononuclear cells: plasmacytoid dendritic cells play a role in stimulating memory rotavirus specific T cells in vitro. Virology. 2007;366(1):174-84. https://doi.org/10.1016/j.virol.2007.04.007.

14. Pane J.A., Webster N.L., Coulson B.S. Rotavirus activates lymphocytes from non-obese diabetic mice by triggering toll-like receptor 7 signaling and interferon production in plasmacytoid dendritic cells. PLoS Pathog. 2014;10(3):e1003998. https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003998.